T-Pro NTR I、NTR II、NTR III轉染試劑是一系列用於高效、可重複轉染各種貼附和非貼附型細胞的核酸的轉染試劑。是優秀的非脂質體轉染試劑複合配方。
T-Pro NTR I、NTR II、NTR III 提供高效可靠的核酸傳遞至各種細胞類型的能力,包括許多難以轉染的細胞系和人類內皮細胞、成纖維細胞和肝細胞等原代細胞。它由特殊的非脂質體陽離子聚合物組成,具有穩定性、水溶性,並不含任何動物源成分。與許多基於脂質體的轉染試劑相比,它具有非常低的毒性,因此非常適合轉染非常敏感的細胞,可獲得最佳的轉染效率和基因表達。
使用 T-Pro NTR I、NTR II、NTR III 進行轉染通常不需要更換培養基,可用於將質粒DNA、寡核苷酸和siRNA 高效傳遞至貼附和非貼附型細胞。它與DNA形成帶有正電荷的穩定保護複合物,這些複合物與帶有負電荷的細胞表面殘基結合,通過內吞作用進入細胞。在內體溶胞器中,T-Pro NTR I、NTR II、NTR III 充當「質子海綿」,緩衝內體溶胞器的酸性pH,抑制內體溶胞器核酸酶的活性,確保複合物的穩定性。持續的質子流入導致溶胞器的滲透性膨脹和破裂,使核酸迅速且幾乎完全地釋放到細胞質中。此外,T-Pro NTR I、NTR II、NTR III 也有助於將DNA運輸到細胞核中,這一特性對於轉染生長緩慢或靜止的細胞尤其有用。
– 在許多細胞類型中,具有優越的轉染效率。
– 對大多數細胞系具有最低的細胞毒性,對敏感細胞溫和。
– 適用於穩定和短暫的轉染。
– 廣泛的細胞系譜 – 非常適用於原代細胞的轉染。
– 簡單、直接且節省時間的操作步驟。
– 與血清和抗生素相容。
– 極具可重複性的結果。
– 非常適合病毒生產。
– 提供針對內皮細胞(例如HUVEC或HDMEC)、巨噬細胞和肝細胞等特定細胞的版本
T-Pro NTR I、II或III轉染試劑是一種特殊專有配方,用於在真核細胞中轉染DNA和RNA,並與核酸形成共價結合,提供高效率和低細胞毒性。
T-Pro NTR I、II或III轉染試劑可在許多細胞類型中使用,包括HEK293、293T、293E、BHK、CHO、COS1、COS7、HeLa、Vero、PC3、L929、NIH 3T3、人類包皮纖維母細胞(HFF)原代細胞、牛主動脈內皮細胞(BAEC)、Sf9和Sf21等。
此外當應用於其他真核細胞時,T-Pro NTR I、II或III轉染試劑也具有高轉染效率。
操作步驟:
提供的DNA量(μg):T-Pro NTR I、II或III轉染試劑的複合物(μl)優選1:2 (1:1~1:4)
例用於24孔板
l 每個孔位加入30μl的無菌塑膠管中的無血清培養基(不含抗生素)。
l 每個孔位加入1.0μg的質粒DNA,輕輕用吸管混合。
l 每個孔位加入1.0〜4.0μl的T-Pro NTR I、II或III,輕輕用吸管混合。
l 將DNA和T-Pro NTR I、II或III溶液的混合物在室溫下反應15分鐘。
l 將DNA/T-Pro NTR I、II或III混合物加入每個孔中的細胞中,輕輕搖晃培養皿混合。將細胞在CO2培養箱中反應18~48小時。